C6orf130 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-415131

概要

OARD1（C6orf130）は、機能アノテーションが限られているヒトのタンパク質コード遺伝子である。しかし、現在得られている証拠から、遺伝子発現やストレス応答過程に影響を及ぼすタンパク質間相互作用を介して、細胞恒常性の制御に関与する可能性が示唆されている。発現パターンや遺伝学的関連解析により、この遺伝子座は神経機能および代謝調節に関連する経路に関与することが示されており、その活性の変化が複雑な疾患表現型に寄与し得る。十分に特徴付けられていない因子であるため、C6orf130については、細胞内局在、相互作用パートナー、ならびに下流の転写またはシグナル伝達上の帰結を明らかにする目的で頻繁に研究されている。機能喪失（loss-of-function）研究は、OARD1が細胞増殖、分化、またはタンパク質毒性・酸化ストレスに対する適応応答に影響するかどうかの解明に役立つ。

C6orf130 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるOARD1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、OARD1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、OARD1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、C6orf130タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、C6orf130シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、OARD1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• C6orf130の機能に不可欠なOARD1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、OARD1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• C6orf130 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびC6orf130 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、OARD1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  C6orf130 HDRプラスミド（h）および C6orf130 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはOARD1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のOARD1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。