C4BPα Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404684-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- C4BPαO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase C4BPα (h) e o Plasmídeo Double Nickase C4BPα (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para C4BPA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:C4BPα Anticorpo (D-5): sc-398720
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
C4BPα Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404684-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C4BPα Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404684-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C4BPA codifica a cadeia alfa da proteína ligante de C4b (C4BPα), um regulador solúvel das vias clássica e das lectinas do complemento, que se liga ao C4b e acelera a dissociação das convertases de C3 para limitar a amplificação do complemento. Ao atuar como cofator da clivagem de C4b mediada pelo fator I, a C4BPα ajuda a manter a homeostase imunológica e protege as superfícies do hospedeiro contra inflamação excessiva mediada pelo complemento. A C4BPα também participa da depuração de complexos imunes e de material apoptótico e pode influenciar respostas dependentes de opsonização na interface entre a imunidade inata e a adaptativa. A atividade desregulada de C4BPA/C4BPα tem sido associada ao desequilíbrio do complemento observado em doenças autoimunes e inflamatórias e a mecanismos de evasão imune associados a tumores, estudados em múltiplos contextos de câncer.
C4BPα O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus C4BPA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de C4BPA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função C4BPA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com C4BPA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.