Plásmido Doble Nickase (h) C1QBP: sc-400911-NIC

C1QBP (proteína de unión al componente 1q del complemento; también conocida como p32/gC1qR) es una proteína humana multifuncional que se localiza predominantemente en las mitocondrias y participa en la regulación de la fosforilación oxidativa, la función del ribosoma mitocondrial y el metabolismo energético celular. También interactúa con componentes del sistema del complemento y puede influir en la señalización inflamatoria y en procesos de la inmunidad innata de manera dependiente del contexto. A través de sus funciones en la homeostasis mitocondrial y en el manejo de ARN/proteínas, C1QBP contribuye al control de la apoptosis, las respuestas al estrés y los programas de proliferación. La expresión o localización alteradas de C1QBP se han asociado con un metabolismo desregulado y fenotipos inflamatorios descritos en múltiples contextos de enfermedad, lo que respalda su utilidad como diana mecanística en investigaciones de inmunometabolismo y biología mitocondrial.

C1QBP El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus C1QBP en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de C1QBP. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de C1QBP. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con C1QBP alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.