C1orf85 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-414006-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- C1orf85O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase C1orf85 (h) e o Plasmídeo Double Nickase C1orf85 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GLMP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
C1orf85 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-414006-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C1orf85 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-414006-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GLMP codifica a C1orf85, uma glicoproteína associada à membrana lisossomal e endolisossomal, implicada na manutenção da integridade dos lisossomos e no suporte ao tráfego e à degradação normais de macromoléculas. Estudos funcionais relacionam o GLMP à homeostase lisossomal, à estabilidade de proteínas de membrana e às respostas celulares ao estresse metabólico, em linha com papéis nas vias de autofagia-lisossomo e no catabolismo intracelular. A disrupção de GLMP tem sido associada a fenótipos de disfunção lisossomal e vem sendo investigada no contexto de patologia metabólica e hepática, em que o processamento lisossomal prejudicado pode contribuir para lesão celular. Como resultado, GLMP/C1orf85 é um alvo útil para dissecar como o controle de qualidade dependente de lisossomos influencia inflamação, proteostase e a comunicação entre organelas em células humanas.
C1orf85 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GLMP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GLMP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GLMP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GLMP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.