Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
c-Myb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421766
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- c-Myb O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico c-Myb, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:c-Myb Anticorpo (D-7): sc-74512
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
c-Myb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421766 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Myb codifica o fator de transcrição c-Myb, um regulador nuclear de ligação ao DNA que controla programas de expressão gênica necessários para proliferação, sobrevivência e comprometimento de linhagem em compartimentos hematopoéticos e em outros compartimentos de progenitores. O c-Myb modula a progressão do ciclo celular e a diferenciação ao coordenar redes transcricionais com cofatores e reguladores de cromatina, integrando sinais que influenciam a autorrenovação e a maturação. A atividade desregulada de MYB tem sido associada a alterações na hematopoiese e a estados transcricionais oncogênicos em múltiplas neoplasias, tornando-o um alvo comum para estudos mecanísticos de transformação e bloqueio da diferenciação. Em modelos murinos, a perturbação de Myb é amplamente utilizada para dissecar o timing do desenvolvimento, a manutenção de células-tronco/progenitoras e os circuitos transcricionais que sustentam fenótipos relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO c-Myb (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Myb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Myb, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Myb na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína c-Myb.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Myb para a investigação da sinalização de c-Myb, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Myb críticos para a função c-Myb
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Myb para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo c-Myb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo c-Myb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Myb. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo c-Myb Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR c-Myb (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Myb para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Myb definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.