C/EBP beta Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419623-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- C/EBP betaO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase C/EBP beta (m) e o Plasmídeo Double Nickase C/EBP beta (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cebpb. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:C/EBP beta Anticorpo (H-7): sc-7962
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
C/EBP beta Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419623-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C/EBP beta Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419623-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Cebpb** de camundongo codifica o **C/EBP beta**, um fator de transcrição do tipo *basic leucine zipper* (bZIP) que coordena programas induzíveis de expressão gênica em resposta a estímulos inflamatórios, estresse metabólico e sinais de diferenciação. O C/EBP beta integra sinais das vias de citocinas e de receptores do tipo Toll (TLR) e coopera com fatores como **NF-κB** e **STATs** para regular o comprometimento da linhagem mieloide, respostas de fase aguda e a adipogênese. Sua atividade influencia o controle do ciclo celular, a sobrevivência e a remodelação tecidual por meio da regulação transcricional de redes gênicas imunes e metabólicas. A desregulação da sinalização de C/EBP beta é frequentemente estudada em contextos de inflamação crônica, disfunção metabólica e reprogramação transcricional oncogênica em modelos de mamíferos.
C/EBP beta O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cebpb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cebpb. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cebpb. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cebpb interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.