BTG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405339

概要

BTG1（B-cell translocation gene 1）は、細胞周期の進行や細胞の静止状態（quiescence）を調節する増殖抑制性の制御因子をコードしており、とりわけ造血系の分化およびリンパ系の恒常性維持において重要な役割を担います。BTG1タンパク質は転写共役調節因子として機能し、CAF1/CNOT7 などの因子との相互作用を介して mRNA のデアデニル化装置（CCR4–NOT 複合体）と連携することで、転写産物の安定性や遺伝子発現プログラムを形成します。これらの作用を通じて、BTG1 はストレス応答や発生チェックポイントに関連するシグナル出力に影響を与え、増殖、アポトーシス、分化を制御する経路を含むさまざまな過程を調節します。BTG1 の発現異常や遺伝子損傷はリンパ系悪性腫瘍の生物学的特性や治療応答表現型と反復して関連づけられており、腫瘍抑制因子様のプロセスや転写制御の機序研究における有用な標的となります。

BTG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBTG1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BTG1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BTG1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BTG1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BTG1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BTG1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BTG1の機能に不可欠なBTG1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BTG1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BTG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBTG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BTG1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BTG1 HDRプラスミド（h）および BTG1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBTG1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBTG1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。