bradykinin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402422-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- bradykininO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase bradykinin (h) e o Plasmídeo Double Nickase bradykinin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KNG1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:bradykinin Anticorpo (4A1): sc-293304
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
bradykinin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402422-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
bradykinin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402422-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O KNG1 humano codifica o cininogénio de alto peso molecular, uma proteína plasmática multifuncional que atua como precursor para a geração de bradicinina durante a ativação do sistema de contacto. A libertação proteolítica de bradicinina por calicreínas ativa recetores de bradicinina para regular o tónus vascular, a permeabilidade endotelial, a sinalização da dor e a produção de mediadores inflamatórios, ligando o KNG1 à interligação entre coagulação e inflamação no âmbito do sistema calicreína–cinina. A atividade do KNG1 articula-se com a coagulação intrínseca e com processos relacionados com o complemento através de interações com o fator XII, a pré-calicreína e parceiros de ligação de superfície no endotélio. A desregulação da produção ou da sinalização da bradicinina está implicada em estados inflamatórios propensos a edema e em disfunção vascular, tornando o KNG1 um ponto relevante para estudos mecanísticos de cascatas de proteases plasmáticas.
bradykinin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KNG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KNG1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KNG1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KNG1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.