bradykinin B2 R Double Nickaseプラスミド (h): sc-401771-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- bradykinin B2 R Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- bradykinin B2 Rダブルニカースプラスミド（h）およびbradykinin B2 Rダブルニカースプラスミド（h2）は、BDKRB2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
bradykinin B2 R Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401771-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
bradykinin B2 R Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401771-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BDKRB2はブラジキニンB2受容体（bradykinin B2 R）をコードしており、ブラジキニンやカリジンなどのキニンに対する応答を媒介する、恒常的に発現するGタンパク質共役受容体（GPCR）です。リガンド結合後は主にGq/11を介してシグナル伝達し、ホスホリパーゼCの活性化、細胞内Ca²⁺動員、さらに下流のPKC、MAPK/ERK、ならびに一酸化窒素（NO）関連シグナルを促進します。これらの経路は、内皮透過性、血管拡張、平滑筋トーヌス、炎症応答の調節に関与します。BDKRB2の活性は、カリクレイン–キニン系とレニン–アンジオテンシン系のクロストークとも交差し、血管恒常性や組織リモデリングに影響を与えます。BDKRB2シグナルの破綻は、炎症性および心血管系の表現型、浮腫関連プロセス、疼痛感作、がん関連の微小環境シグナルに関与することが示唆されており、GPCR生物学や血管炎症の機序解析研究における標的として有用です。
bradykinin B2 R ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における BDKRB2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、BDKRB2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、BDKRB2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、BDKRB2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。