BMP-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401979
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BMP-6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BMP-6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BMP-6 Anticorpo (74219.11): sc-57042
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BMP-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401979 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
BMP6 codifica a proteína morfogenética óssea 6 (BMP-6), um ligante secretado da superfamília TGF-β que sinaliza principalmente por meio de receptores BMP do tipo I/II com atividade de quinase serina/treonina, ativando programas transcricionais dependentes de SMAD1/5/8. A BMP-6 contribui para a diferenciação osteogênica e condrogênica, a regulação da matriz extracelular e a remodelação tecidual, além de se integrar a contextos de sinalização associados ao padrão de desenvolvimento e à fibrose. Na homeostase do ferro, a BMP-6 é um importante regulador a montante da expressão hepática de hepcidina via a via BMP/SMAD, conectando a atividade de BMP6 ao equilíbrio sistêmico de ferro. A desregulação da sinalização de BMP6 tem sido associada a distúrbios envolvendo mineralização aberrante, fibrose e metabolismo do ferro alterado, o que sustenta estudos mecanísticos em modelos celulares relevantes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BMP-6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BMP6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BMP6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BMP6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BMP-6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BMP6 para a investigação da sinalização de BMP-6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BMP6 críticos para a função BMP-6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BMP6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BMP-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BMP-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BMP6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BMP-6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BMP-6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BMP6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BMP6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.