BMP-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401979

概要

BMP6は骨形成タンパク質6（BMP-6）をコードしており、分泌型のTGF-βスーパーファミリーリガンドとして、主にBMPタイプI/IIのセリン／スレオニンキナーゼ受容体を介してシグナルを伝達し、SMAD1/5/8依存的な転写プログラムを活性化します。BMP-6は、骨芽細胞系および軟骨細胞系への分化、細胞外マトリックスの制御、組織リモデリングに寄与するほか、発生のパターニングや線維化に関連するシグナル伝達の文脈とも交差します。鉄恒常性の観点では、BMP-6はBMP/SMAD経路を介して肝臓におけるヘプシジン発現を上流で制御する主要な因子であり、BMP6の活性を全身の鉄バランスと結び付けています。BMP6シグナルの破綻は、異常な石灰化、線維化、鉄代謝の変調を伴う疾患と関連づけられており、関連する細胞モデルにおける機序研究を支持します。

BMP-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBMP6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BMP6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BMP6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BMP-6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BMP-6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BMP6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BMP-6の機能に不可欠なBMP6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BMP6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BMP-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBMP-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BMP6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BMP-6 HDRプラスミド（h）および BMP-6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBMP6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBMP6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。