betaKlotho Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401614
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- betaKlotho O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico betaKlotho, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
betaKlotho Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401614 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KLB codifica a betaKlotho, um co-receptor transmembranar de passagem única que confere especificidade de ligante aos fatores de crescimento de fibroblastos endócrinos, sobretudo FGF19 e FGF21, por meio da formação de complexos com os FGFRs. Em tecidos humanos como fígado e tecido adiposo, a sinalização dependente de betaKlotho regula a ativação da via MAPK/ERK e programas transcricionais que controlam a homeostase de ácidos biliares, a utilização de lipídios, o metabolismo da glicose e o balanço energético. Alterações na expressão de KLB ou na função da betaKlotho têm sido associadas à desregulação metabólica, incluindo fenótipos ligados à obesidade, resistência à insulina e doença hepática gordurosa não alcoólica, e podem modular a sinalização de estresse e inflamação em células metabolicamente ativas. Essas características fazem de KLB um ponto útil para dissecar vias de FGF endócrino e a comunicação metabólica específica de cada tecido.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO betaKlotho (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KLB em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KLB, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KLB na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína betaKlotho.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KLB para a investigação da sinalização de betaKlotho, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KLB críticos para a função betaKlotho
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KLB para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo betaKlotho Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo betaKlotho Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KLB. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo betaKlotho Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR betaKlotho (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KLB para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KLB definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.