Bcl-xS/L Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400170-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Bcl-xS/LO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Bcl-xS/L (h) e o Plasmídeo Double Nickase Bcl-xS/L (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BCL2L1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Bcl-xL Anticorpo (H-5): sc-8392
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Bcl-xS/L Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400170-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Bcl-xS/L Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400170-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BCL2L1 codifica as isoformas humanas da proteína Bcl-xS/L, reguladores centrais da permeabilização da membrana externa mitocondrial e da apoptose intrínseca. A Bcl-xL é predominantemente antiapoptótica, restringindo a ativação de BAX/BAK e a liberação de citocromo c, enquanto a Bcl-xS contrabalança a sinalização pró-sobrevivência e pode sensibilizar as células a estímulos apoptóticos. Ao integrar-se às respostas ao estresse mediadas por p53 e a vias de sobrevivência como PI3K–AKT e MAPK, BCL2L1 influencia decisões de destino celular, a homeostase mitocondrial e a adaptação ao estresse celular. A expressão desregulada de BCL2L1 e o desequilíbrio entre isoformas são frequentemente associados à evasão da apoptose, resistência a terapias e progressão tumoral, tornando-o um alvo comum em estudos mecanísticos de morte e sobrevivência celular.
Bcl-xS/L O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BCL2L1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BCL2L1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BCL2L1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BCL2L1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.