Plásmido Doble Nickase (h2) Bcl-9L: sc-415290-NIC-2
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h2)Bcl-9L consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Bcl-9L (h2) y el plásmido de doble nickasa Bcl-9L (h22) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a BCL9L. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h2) Bcl-9L | sc-415290-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano BCL9L codifica Bcl-9L, un coactivador transcripcional que se une a la β-catenina y coopera con los factores TCF/LEF para potenciar la señalización canónica de Wnt y los programas de expresión génica aguas abajo que controlan la proliferación, la diferenciación y la homeostasis epitelial. A través de sus interacciones con complejos transcripcionales nucleares y reguladores asociados a la cromatina, Bcl-9L contribuye a definir una selección de dianas de Wnt específica del contexto e influye en procesos como la especificación del destino celular, la migración y las propiedades tipo madre. La desregulación de la actividad transcripcional de β-catenina dependiente de BCL9L se ha relacionado con la salida aberrante de la vía Wnt observada en múltiples cánceres y trastornos del desarrollo. La edición genética de BCL9L facilita estudios mecanísticos de la transcripción Wnt/β-catenina, el mapeo de dependencias de interacciones proteína–proteína y cribados de genómica funcional para desentrañar el crosstalk de la vía y las redes transcripcionales oncogénicas en células humanas.
Bcl-9L El plásmido de doble nicasa (h2) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BCL9L en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BCL9L. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BCL9L. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BCL9L alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.