BAI-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406051

概要

ADGRB2 は、接着型 G タンパク質共役受容体である BAI-2（brain-specific angiogenesis inhibitor 2：脳特異的血管新生阻害因子2）をコードする遺伝子であり、神経系に豊富に発現する多ドメイン膜受容体として、細胞—細胞および細胞—マトリックス間相互作用に関与すると考えられています。接着型 GPCR としての BAI-2 は、細胞外からの刺激（シグナル）を細胞内のシグナル伝達プログラムへと統合し、細胞骨格の構築、膜動態、細胞間コミュニケーションを調節することで、神経発生や組織恒常性の維持などの過程に寄与します。接着型 GPCR のシグナル伝達が破綻すると、血管新生や炎症に関わる微小環境の変化、ならびに細胞運動性や分化状態の変化と関連することが報告されています。そのため ADGRB2/BAI-2 は、接着依存的な経路が疾患関連表現型に影響する神経科学領域や、腫瘍関連シグナル伝達ネットワークなどの文脈で研究されています。

BAI-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるADGRB2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADGRB2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADGRB2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BAI-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BAI-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADGRB2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BAI-2の機能に不可欠なADGRB2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADGRB2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BAI-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBAI-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADGRB2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BAI-2 HDRプラスミド（h）および BAI-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADGRB2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADGRB2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。