BAALC Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405852

Visão geral

BAALC (brain and acute leukemia, cytoplasmic) codifica uma proteína citoplasmática enriquecida em contextos hematopoéticos e de neurodesenvolvimento e implicada na regulação do estado de células progenitoras, incluindo aspectos de proliferação e diferenciação. Em linhagens mieloides, a expressão de BAALC é frequentemente usada como um correlato molecular de programas transcricionais imaturos e de saídas de sinalização alteradas, cruzando-se com vias que moldam a progressão do ciclo celular, a sobrevivência e o comprometimento de linhagem. Níveis desregulados de BAALC têm sido associados a leucemias agudas, nas quais é estudado como parte de redes mais amplas de expressão gênica ligadas à leucemogênese e à heterogeneidade da doença. Essas características tornam o BAALC um nodo útil para dissecar mecanismos de manutenção de células-tronco/progenitoras e de sinalização hematopoética aberrante em modelos celulares humanos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BAALC (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BAALC em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BAALC, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BAALC na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BAALC.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BAALC para a investigação da sinalização de BAALC, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BAALC críticos para a função BAALC
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BAALC para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo BAALC Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BAALC Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BAALC. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo BAALC Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BAALC (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BAALC para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BAALC definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.