AVP Receptor V1a CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401691

概要

AVPR1Aはアルギニン・バソプレシン受容体V1aをコードしており、主にGq/11に共役してホスホリパーゼCを活性化するロドプシン様GPCRです。これによりIP3/DAGシグナルが生成され、細胞内Ca²⁺濃度の上昇と、PKC依存的な転写プログラムの誘導が起こります。V1a受容体シグナルは、血管平滑筋の収縮、血小板の反応性、肝臓でのグリコーゲン分解、ならびに社会行動やストレス関連行動に関与する神経修飾回路を調節します。細胞内では、AVPR1Aの活性はMAPK/ERKシグナル、カルシウム依存的な遺伝子制御、収縮性や遊走に影響する細胞骨格リモデリングとも交差します。バソプレシン–V1aシグナルの制御異常は、心血管系および代謝表現型、さらに神経精神疾患関連の形質との関連で研究されており、組織コンテキストをまたいだ受容体機能の機序研究を後押ししています。

AVP Receptor V1a CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるAVPR1A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、AVPR1A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、AVPR1Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、AVP Receptor V1aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、AVP Receptor V1aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、AVPR1A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• AVP Receptor V1aの機能に不可欠なAVPR1Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、AVPR1Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• AVP Receptor V1a CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびAVP Receptor V1a CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、AVPR1A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  AVP Receptor V1a HDRプラスミド（h）および AVP Receptor V1a HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAVPR1Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAVPR1A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。