ATP8A1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406843

개요

ATP8A1은 P4-ATPase 계열의 인지질 플리파아제(phospholipid flippase)를 암호화하며, 인지질세린(phosphatidylserine)과 인지질에탄올아민(phosphatidylethanolamine) 같은 아미노인지질을 막의 두 층(leaflet) 사이로 이동시켜 세포막 지질 비대칭성을 유지합니다. 이러한 활성은 막 곡률, 소포 출아(vesicle budding), 엔도사이토시스 수송(endocytic trafficking)을 뒷받침하여 세포골격 조직화와 극성화된 막 역학에 영향을 줍니다. 지질 비대칭성이 깨지면 신호전달 플랫폼과 막 의존적 과정이 변할 수 있어, ATP8A1의 기능은 세포 내 수송 및 세포 생존을 조절하는 경로와 연결됩니다. ATP8A1의 조절 이상은 막 조성과 수송이 세포 항상성의 핵심 결정요인인 신경학적 및 대사성 표현형과 관련된 맥락에서 연구되어 왔습니다.

ATP8A1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ATP8A1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ATP8A1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ATP8A1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ATP8A1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ATP8A1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ATP8A1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ATP8A1 기능에 중요한 ATP8A1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ATP8A1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ATP8A1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 ATP8A1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ATP8A1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ATP8A1 HDR 플라스미드 (h) 및 ATP8A1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ATP8A1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ATP8A1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.