



주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
Atg4b 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-404173-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Atg4b 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-404173-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATG4B는 LC3와 GABARAP을 포함한 ATG8 계열 단백질을 처리하는 시스테인 프로테아제인 Atg4b를 암호화한다. Atg4b는 이들 단백질이 지질화(lipidation)될 수 있도록 프라이밍하고, 자가포식소체(autophagosome) 성숙 과정에서 탈지질화(delipidation)를 통해 재활용되도록 함으로써 ATG8 계열을 조절한다. 이러한 단계들을 통해 Atg4b는 자가포식 플럭스(autophagic flux), 미토파지(mitophagy), 그리고 손상된 단백질 및 세포소기관의 제거를 조절하며, 세포 스트레스 적응과 대사 항상성과도 연결된다. ATG4B에 의한 자가포식 경로 조절은 mTOR 및 AMPK 신호전달과 교차하고, 항원 제시와 선천면역 반응에도 영향을 미친다. ATG4B 활성의 이상 조절과 자가포식 역학의 변화는 암 생물학, 신경퇴행, 염증성 표현형과 연관되어 보고되어 왔으며, 따라서 ATG4B는 단백질 항상성(proteostasis)의 기전 연구를 위한 유용한 핵심 노드로 여겨진다.
Atg4b 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 ATG4B 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 ATG4B 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 ATG4B의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, ATG4B 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
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