ASS1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419220-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ASS1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ASS1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ASS1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ass1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ASS1 Anticorpo (E-12): sc-365475
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ASS1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419220-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ASS1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419220-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Ass1 de camundongo codifica a argininosuccinato sintase 1 (ASS1), uma enzima citosólica que catalisa a condensação de citrulina e aspartato para formar argininosuccinato no ciclo da ureia. Por meio dessa etapa, a ASS1 contribui para a eliminação de nitrogênio, a biossíntese de arginina e o metabolismo a jusante relacionado ao óxido nítrico, ao regular a disponibilidade de arginina. A atividade da ASS1 se interconecta com a homeostase de aminoácidos e o fluxo de nitrogênio entre mitocôndria e citosol, influenciando respostas celulares ao estresse metabólico. Alterações na expressão ou na função de ASS1 são amplamente usadas como marcador molecular em estudos de disfunção do ciclo da ureia e de reprogramação metabólica relevantes para a fisiologia de hepatócitos e estados proliferativos.
ASS1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ass1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ass1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ass1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ass1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.