ASPP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404330-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ASPP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ASPP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ASPP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PPP1R13B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ASPP1 Anticorpo (LX011): sc-53903
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ASPP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404330-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ASPP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404330-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PPP1R13B codifica a proteína estimuladora de apoptose do p53 1 (ASPP1), um regulador da transcrição responsiva ao estresse que modula a atividade da família p53 e influencia decisões sobre o destino celular. A ASPP1 promove programas transcricionais ligados à apoptose e ao controle do ciclo celular ao facilitar o recrutamento de p53/p63/p73 a promotores específicos de genes-alvo, fazendo interface com vias de resposta a dano no DNA e de sinalização de checkpoints. Em razão dessas funções, PPP1R13B tem sido estudado no contexto de competência apoptótica alterada, atenuação de vias supressoras de tumor e desregulação mais ampla de redes transcricionais relevantes para a transformação oncogênica. Seu papel regulatório também o torna útil para investigar como saídas específicas do p53, dependentes do contexto, são moldadas pela disponibilidade de cofatores e pelo estado da cromatina.
ASPP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PPP1R13B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PPP1R13B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PPP1R13B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PPP1R13B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.