ASPP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423473
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ASPP1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ASPP1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ASPP1 Anticorpo (LX011): sc-53903
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ASPP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423473 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ppp1r13b codifica a ASPP1, uma proteína estimuladora de apoptose que se liga ao domínio de ligação ao DNA dos fatores de transcrição da família p53 e direciona sua atividade para genes-alvo pró-apoptóticos. Por meio da modulação da transcrição dependente de p53/p63/p73, a ASPP1 contribui para a apoptose induzida por estresse, o controle do ciclo celular e a manutenção da integridade genômica. A função da ASPP1 se cruza com a sinalização da resposta a danos no DNA e com redes de correguladores transcricionais que moldam decisões de destino celular. A regulação alterada desse eixo é relevante para a biologia tumoral e outras condições nas quais defeitos de apoptose e de controle de checkpoints contribuem para fenótipos celulares associados a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ASPP1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ppp1r13b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ppp1r13b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ppp1r13b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ASPP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ppp1r13b para a investigação da sinalização de ASPP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ppp1r13b críticos para a função ASPP1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ppp1r13b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ASPP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ASPP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ppp1r13b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ASPP1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ASPP1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ppp1r13b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ppp1r13b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.