ASH2L Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423846
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ASH2L O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ASH2L, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ASH2L Anticorpo (2046D2a): sc-81184
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ASH2L Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423846 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ash2l codifica a ASH2L, um componente central dos complexos metiltransferases de histona SET1/MLL responsáveis pela metilação de H3K4, que regulam o estado da cromatina e programas de transcrição. Por meio do controle da metilação de H3K4, a ASH2L contribui para a expressão gênica dependente da RNA polimerase II, a atividade de enhancers e a manutenção epigenética da identidade celular durante o desenvolvimento e a diferenciação. A regulação da cromatina dependente de ASH2L intersecciona com vias que governam a progressão do ciclo celular, respostas a danos no DNA e especificação de linhagem, tornando-a relevante para estudos de biologia de células-tronco e hematopoiese. A desregulação de ASH2L ou da atividade dos complexos MLL/SET1 tem sido implicada em estados transcricionais oncogênicos e anomalias do desenvolvimento, sustentando seu uso como um nó mecanístico em modelos de doença voltados à epigenética.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ASH2L (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ash2l em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ash2l, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ash2l na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ASH2L.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ash2l para a investigação da sinalização de ASH2L, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ash2l críticos para a função ASH2L
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ash2l para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ASH2L Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ASH2L Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ash2l. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ASH2L Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ASH2L (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ash2l para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ash2l definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.