ASCT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402795-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ASCT2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ASCT2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ASCT2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC1A5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ASCT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402795-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ASCT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402795-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC1A5 codifica o transportador humano de aminoácidos neutros ASCT2, uma via principal para a captação celular e a troca de glutamina, asparagina, serina e treonina através da membrana plasmática. Ao controlar a disponibilidade de aminoácidos, o ASCT2 influencia programas de detecção de nutrientes e de biossíntese, incluindo a sinalização do mTORC1, a homeostase redox via metabolismo da glutationa e o suporte anaplerótico do ciclo do TCA por meio da glutaminólise. Alterações na expressão de SLC1A5 e na atividade do transportador têm sido associadas à reprogramação metabólica em células de proliferação rápida e são estudadas no contexto da biologia do câncer, da ativação de células imunes e de processos neuroinflamatórios. O fluxo de aminoácidos dependente de ASCT2 também é relevante para a resposta integrada ao estresse e para a regulação da autofagia sob limitação de nutrientes.
ASCT2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC1A5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC1A5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC1A5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC1A5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.