ASCL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402039-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ASCL1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ASCL1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ASCL1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ASCL1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ASCL1 Anticorpo (G-7): sc-390794
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ASCL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402039-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ASCL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402039-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ASCL1 (fator de transcrição 1 da família bHLH achaete-scute) é um regulador proneural que promove o comprometimento com a linhagem neuronal e a diferenciação ao se ligar a motivos E-box e coordenar programas transcricionais que controlam a saída do ciclo celular, o crescimento de neuritos e decisões de destino neurogênico. Em contextos de desenvolvimento e de reprogramação celular, o ASCL1 interage com a sinalização Notch e com o remodelamento da cromatina para equilibrar a manutenção de progenitores versus a diferenciação, sendo comumente utilizado como marcador e efetor de estados transcricionais do tipo neuroendócrino. A expressão desregulada de ASCL1 tem sido associada a plasticidade de linhagem aberrante e a programas alterados de diferenciação neuroendócrina, tornando-o relevante para o estudo de circuitos transcricionais no desenvolvimento neural e na biologia tumoral. Essas propriedades sustentam investigações sobre especificação de destino celular, redes de fatores de transcrição e controle epigenético da expressão gênica neuronal.
ASCL1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ASCL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ASCL1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ASCL1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ASCL1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.