Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
ARP Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-428989-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARPO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ARP (m) e o Plasmídeo Double Nickase ARP (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Manf. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ARP Anticorpo (B-3): sc-515906
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARP Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-428989-NIC | 20 µg | $410.00 |
O fator neurotrófico derivado de astrócitos mesencefálicos (MANF) é uma proteína residente do retículo endoplasmático (RE), induzível por estresse, que dá suporte à proteostase e à homeostase da via secretória em células de mamíferos. Em camundongos, o MANF está intimamente associado à resposta a proteínas mal dobradas (UPR) e ao controle de qualidade associado ao RE (ERAD), modulando programas de sobrevivência celular sob estresse do RE e perturbações no dobramento de proteínas. Alterações na sinalização de MANF têm sido estudadas em contextos de neurodegeneração, estresse metabólico e lesão tecidual inflamatória, nos quais o estresse do RE e a vulnerabilidade específica de tipos celulares se sobrepõem. Essas características fazem do MANF um alvo útil para investigar a adaptação ao estresse do RE, a função de células secretoras e a remodelação transcricional ligada ao estresse em modelos biomédicos.
ARP O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Manf em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Manf. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Manf. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Manf interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.