Arnt 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403101
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Arnt 2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Arnt 2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Arnt 2 Anticorpo (B-11): sc-393683
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Arnt 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403101 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ARNT2 (translocador nuclear do receptor de hidrocarbonetos arílicos 2) codifica um fator de transcrição bHLH-PAS que forma heterodímeros com parceiros como membros da família HIF para regular programas de expressão gênica responsivos a estímulos. Arnt2 contribui para redes transcricionais de detecção de oxigênio e de desenvolvimento ao favorecer a ligação ao DNA em elementos de resposta à hipóxia e ao coordenar o controle dependente de cromatina de loci-alvo. É altamente relevante para estudos de diferenciação neuronal e adaptação celular ao estresse metabólico ou ambiental, nos quais a transcrição dependente de ARNT2 pode influenciar a sobrevivência e assinaturas gênicas específicas de linhagem. A desregulação de vias associadas a ARNT2 tem sido relacionada a alterações nas saídas de sinalização hipóxica e a fenótipos do neurodesenvolvimento, tornando-o um nó útil para a investigação mecanística de circuitos transcricionais com domínio PAS.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Arnt 2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ARNT2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ARNT2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ARNT2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Arnt 2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ARNT2 para a investigação da sinalização de Arnt 2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ARNT2 críticos para a função Arnt 2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ARNT2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Arnt 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Arnt 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ARNT2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Arnt 2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Arnt 2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ARNT2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ARNT2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.