ARK-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423193

概要

Aurkc は、Aurora kinase C（ARK-3）をコードするセリン/スレオニンキナーゼであり、中心体機能、紡錘体形成、細胞質分裂に関与する有糸分裂基質をリン酸化することで、染色体動態と細胞分裂を制御します。マウスの生殖細胞では、AURKC 活性は減数分裂の進行と正確な染色体分配にとりわけ重要で、キネトコア‐微小管結合やスピンドルチェックポイントを協調させる中核的な有糸分裂制御ネットワークとも連動しています。Aurora キナーゼシグナルの異常は、異数性やゲノム不安定性と関連しており、これらは生殖生物学、発生遺伝学、がん関連の細胞周期モデルで頻繁に研究されるプロセスです。そのため Aurkc の撹乱は、染色体の誤分配や細胞周期制御の機構を解明するための有用な切り口となります。

ARK-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAurkc遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Aurkc内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Aurkcのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ARK-3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ARK-3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Aurkc欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ARK-3の機能に不可欠なAurkcエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Aurkcゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ARK-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびARK-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Aurkc遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ARK-3 HDRプラスミド（m）および ARK-3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAurkcホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAurkc標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。