Arg Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417779-NIC

A ABL2 humana codifica a tirosina quinase não receptora Arg, uma proteína citoplasmática de sinalização que integra sinais de receptores de fatores de crescimento e de complexos de adesão para regular a remodelação do citoesqueleto de actina, a formação de protrusões de membrana e a motilidade celular. A Arg fosforila múltiplas proteínas do citoesqueleto e adaptadoras, conectando a sinalização por quinase a processos como endocitose, orientação axonal e renovação de adesões focais. Por meio dos seus domínios SH3/SH2 e do domínio quinase, a Arg participa de vias a jusante de integrinas e de receptores tirosina quinase que influenciam a migração, comportamentos relacionados à invasão e respostas celulares ao estresse. A atividade desregulada de quinases da família ABL e alterações no controle do citoesqueleto dependente de Arg têm sido associadas a programas de sinalização oncogênica e a fenótipos de movimento celular aberrante em pesquisas de biologia do câncer.

Arg O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ABL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ABL2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ABL2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ABL2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.