Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
ARF6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400799
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARF6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ARF6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ARF6 Anticorpo (3A-1): sc-7971
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARF6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400799 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O fator de ribosilação de ADP 6 (ARF6) é uma pequena GTPase que regula a dinâmica da membrana plasmática ao controlar a endocitose, a reciclagem e a remodelação do citoesqueleto de actina. Ao alternar entre os estados ligados a GDP e a GTP, o ARF6 coordena o tráfego de integrinas, caderinas e receptores tirosina-quinase, influenciando a polaridade celular, a migração e a citocinese. A sinalização dependente de ARF6 interage com as vias PI3K/AKT, MAPK e de GTPases da família Rho para moldar a protrusão de membrana e o transporte vesicular. A atividade desregulada de ARF6 tem sido associada a fenótipos invasivos e a alterações no tráfego de receptores em modelos de cancro, bem como a funções aberrantes de neurónios e células imunitárias em contextos relevantes para a doença.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ARF6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ARF6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ARF6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ARF6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ARF6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ARF6 para a investigação da sinalização de ARF6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ARF6 críticos para a função ARF6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ARF6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ARF6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ARF6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ARF6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ARF6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ARF6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ARF6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ARF6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.