apoD Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402012-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- apoDO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase apoD (h) e o Plasmídeo Double Nickase apoD (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para APOD. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:apoD Anticorpo (C-1): sc-373965
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
apoD Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402012-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
apoD Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402012-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APOD codifica a apolipoproteína D (apoD), uma glicoproteína secretada da família das lipocalinas que se liga e transporta pequenos ligantes hidrofóbicos, como o ácido araquidônico e moléculas relacionadas a esteroides. A apoD participa do tráfego extracelular de lipídios e da homeostase redox, influenciando a composição lipídica das membranas, as respostas ao estresse oxidativo e a sinalização inflamatória em tecidos que incluem o cérebro e o sistema vascular. Sua expressão é regulada em contextos de estresse celular e envelhecimento, ligando o APOD a vias que modulam a peroxidação lipídica e a proteostase. Níveis alterados de apoD têm sido relatados em cenários de doenças neurodegenerativas e metabólicas, sustentando seu uso como marcador mecanístico em pesquisas de patologia associada a lipídios.
apoD O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus APOD em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de APOD. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função APOD. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com APOD interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.