apoC-IV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418944

Visão geral

Apoc4 codifica a apolipoproteína C-IV (apoC-IV), uma apolipoproteína secretada associada principalmente a partículas de lipoproteínas circulantes e envolvida no transporte e no remodelamento de lipídios. Em camundongos, a apoC-IV está ligada à regulação do metabolismo de lipoproteínas ricas em triglicerídeos e interage com vias que controlam a atividade da lipoproteína lipase, o processamento hepático de lipídios e a troca de lipídios entre as frações VLDL/IDL/HDL. Variações na composição de apolipoproteínas podem influenciar indiretamente o balanço energético sistêmico e a sinalização inflamatória por meio de alterações no fluxo lipídico e em mediadores derivados de lipídios. Assim, Apoc4 é relevante para estudos sobre mecanismos de dislipidemia, fenótipos cardiometabólicos e homeostase lipídica centrada no fígado em contextos fisiológicos e de modelos de doença.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO apoC-IV (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Apoc4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Apoc4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Apoc4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína apoC-IV.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Apoc4 para a investigação da sinalização de apoC-IV, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Apoc4 críticos para a função apoC-IV
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Apoc4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo apoC-IV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo apoC-IV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Apoc4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo apoC-IV Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR apoC-IV (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Apoc4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Apoc4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.