apoC-IV Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418944

Descripción general

Apoc4 codifica la apolipoproteína C‑IV (apoC‑IV), una apolipoproteína secretada asociada principalmente a las partículas de lipoproteínas circulantes e implicada en el transporte y la remodelación de lípidos. En el ratón, la apoC‑IV se relaciona con la regulación del metabolismo de las lipoproteínas ricas en triglicéridos e interactúa con vías que controlan la actividad de la lipoproteína lipasa, el manejo hepático de lípidos y el intercambio lipídico entre las fracciones VLDL/IDL/HDL. La variación en la composición de apolipoproteínas puede influir de manera indirecta en el balance energético sistémico y en la señalización inflamatoria mediante cambios en el flujo de lípidos y en mediadores derivados de lípidos. Por ello, Apoc4 es relevante para estudios sobre mecanismos de dislipidemia, fenotipos cardiometabólicos y homeostasis lipídica centrada en el hígado, tanto en contextos fisiológicos como en modelos de enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO apoC-IV (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Apoc4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Apoc4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Apoc4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína apoC-IV.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Apoc4 para la investigación de la señalización de apoC-IV, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Apoc4 críticos para la función de apoC-IV
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Apoc4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido apoC-IV CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido apoC-IV CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Apoc4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR apoC-IV (m) y el plásmido HDR apoC-IV (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Apoc4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Apoc4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.