APNG CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-435240

개요

마우스 Mpg는 알킬퓨린 DNA N-글리코실레이스(APNG)를 암호화하는데, APNG는 염기 절제 수선(BER) 효소로서 3-메틸아데닌과 하이폭산틴을 포함해 다양한 알킬화 및 탈아미노화된 퓨린 손상을 인식하고 절제합니다. APNG는 손상된 염기의 제거를 시작함으로써 복제 정확도를 유지하고, 내인성 대사 및 환경성 유전독성 물질로 인해 발생하는 돌연변이 형성을 제한하는 데 기여합니다. 또한 APNG 활성은 APEX1, POLβ, XRCC1과 같은 핵심 BER 인자들과 연계되어 손상 처리와 가닥 복원을 완결합니다. MPG/APNG 기능의 변화는 발암 연구와 관련된 유전체 불안정성 표현형, 그리고 세포 및 마우스 모델에서 DNA 알킬화 스트레스에 대한 민감성과 연관되어 보고되었습니다.

APNG CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Mpg 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Mpg 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Mpg의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 APNG 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 APNG 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Mpg 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• APNG 기능에 중요한 Mpg 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Mpg 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• APNG CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 APNG CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Mpg 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  APNG HDR 플라스미드 (m) 및 APNG HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Mpg 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Mpg 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.