APC7 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-425084-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- APC7O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase APC7 (m) e o Plasmídeo Double Nickase APC7 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Anapc7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:APC7 Anticorpo (A-6): sc-365649
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
APC7 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-425084-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
APC7 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-425084-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene murino **Anapc7** codifica a **APC7**, uma subunidade central com repetições tetratricopeptídicas (TPR) do **complexo promotor da anáfase/ciclossoma (APC/C)**, uma ligase E3 de ubiquitina que garante a progressão oportuna pela mitose e pela fase G1 ao direcionar reguladores-chave do ciclo celular para degradação pelo proteassoma. A APC7 dá suporte à montagem do APC/C e às interações com coativadores que coordenam o reconhecimento de substratos durante o checkpoint de montagem do fuso, o início da anáfase e a saída da mitose. A disrupção da função do APC/C pode desestabilizar a manutenção do genoma ao prejudicar a separação das cromátides e a fidelidade dos checkpoints, associando subunidades do APC/C a fenótipos ligados à aneuploidia em tecidos proliferativos. Assim, **Anapc7** é frequentemente estudado em vias que governam a proteólise mediada por ubiquitina, a segregação cromossômica e o controle do ciclo celular em modelos murinos.
APC7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Anapc7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Anapc7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Anapc7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Anapc7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.