APC2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408180-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- APC2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase APC2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase APC2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para APC2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
APC2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408180-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
APC2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408180-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APC2 codifica a adenomatous polyposis coli 2, uma proteína de suporte do citoesqueleto e da sinalização que contribui para a regulação da via Wnt/β-catenina ao promover a renovação (turnover) da β-catenina e ao controlar resultados transcricionais ligados ao destino celular e à proliferação. A APC2 também participa da dinâmica dos microtúbulos, da polarização neuronal e da migração celular por meio de interações com proteínas associadas à actina e aos microtúbulos, sustentando uma arquitetura tecidual coordenada. A desregulação ou a expressão alterada de membros da família APC está associada a sinalização Wnt descontrolada, instabilidade cromossômica e programas de diferenciação aberrantes, tornando a APC2 um alvo relevante para estudos mecanísticos de controle da via em modelos de desenvolvimento e de doença.
APC2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus APC2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de APC2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função APC2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com APC2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.