Plásmido Doble Nickase (m) ANT1: sc-419112-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)ANT1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ANT1 (m) y el plásmido de doble nickasa ANT1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Slc25a4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) ANT1 | sc-419112-NIC | 20 µg | $410.00 |
Slc25a4 codifica el translocador de nucleótidos de adenina 1 (ANT1), un transportador ADP/ATP de la membrana interna mitocondrial que intercambia ADP citosólico por ATP de la matriz para sostener la fosforilación oxidativa y la homeostasis energética celular. ANT1 está estrechamente vinculado a la actividad de la cadena respiratoria, al potencial de membrana mitocondrial y a la regulación de procesos asociados a la transición de permeabilidad que influyen en la apoptosis y en las respuestas al estrés en tejidos de alta demanda energética. En el ratón, Slc25a4 se estudia con frecuencia en el contexto de la bioenergética mitocondrial, el metabolismo de las fibras musculares y la comunicación entre orgánulos que determina el equilibrio redox. La alteración de la función de ANT1 se ha asociado con fenotipos de disfunción mitocondrial relevantes para modelos de investigación neuromuscular y cardiometabólica.
ANT1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Slc25a4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Slc25a4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Slc25a4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Slc25a4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.