Annexin-2/ANXA2 Double Nickaseプラスミド (h): sc-400296-NIC

ANXA2はアネキシンA2（annexin A2）をコードしており、Ca²⁺依存的にリン脂質に結合するタンパク質です。細胞膜および皮質アクチンと会合して、膜輸送、細胞骨格リモデリング、細胞運動を協調的に制御します。アネキシンA2はS100A10との複合体として機能し、プラスミン産生と細胞周囲のタンパク質分解を促進することで、細胞外マトリックス（ECM）の代謝回転や創傷に関連するシグナル伝達と結びついています。また、エンドサイトーシス／エキソサイトーシス、脂質ラフトの構造形成、線溶系および炎症経路の制御にも関与します。ANXA2の発現量や局在の異常は、複数の腫瘍タイプや血管・炎症性疾患で報告されており、浸潤、血管新生応答、ストレス適応的な膜ダイナミクスを研究するうえで有用な標的（ノード）となります。

Annexin-2/ANXA2 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における ANXA2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、ANXA2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、ANXA2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、ANXA2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。