Plasmide Double Nickase (m) Androgen Receptor: sc-419181-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Androgen Receptor correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Androgen Receptor Double Nickase (m) et le plasmide Androgen Receptor Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ar. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Androgen Receptor Antibody (AN1-15): sc-56824
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Androgen Receptor | sc-419181-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Ar* code le récepteur des androgènes (AR), un récepteur nucléaire activé par un ligand qui se lie aux androgènes et régule des programmes transcriptionnels contrôlant le développement, la physiologie reproductive et l’homéostasie tissulaire. Après activation, AR se transloque vers le noyau, se fixe sur des éléments de réponse aux androgènes et coopère avec des complexes de remodelage de la chromatine et des corégulateurs pour moduler l’expression génique au sein de voies impliquées dans la progression du cycle cellulaire, la différenciation et le métabolisme. La signalisation via AR s’entrecroise avec les réseaux PI3K/AKT, MAPK et Wnt/β-caténine, intégrant les signaux hormonaux aux réponses de croissance et de stress. Une activité d’AR dérégulée et des modifications de l’expression du récepteur sont largement utilisées comme modèles mécanistiques en biologie hormonodépendante, notamment dans l’étude des troubles de la reproduction et de la tumorigenèse induite par les hormones dans des systèmes murins.
Androgen Receptor Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ar dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ar. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ar. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ar.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.