Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Alix Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422154
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Alix O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Alix, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Alix Anticorpo (1A12): sc-53540
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Alix Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422154 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Pdcd6ip codifica a ALIX, um adaptador multifuncional que acopla a remodelação de membranas ao tráfego endossomal por meio de interações com componentes do ESCRT, incluindo proteínas CHMP4, e com parceiros como o TSG101. Em células de camundongo, a ALIX contribui para a biogênese de corpos multivesiculares, a liberação de exossomos, a abscisão citocinética e o reparo da membrana plasmática, e pode influenciar a sinalização ligada à apoptose por meio de suas redes de ligação. A atividade do ESCRT dependente de ALIX também é cooptada durante o brotamento de vírus envelopados e regula a renovação (turnover) de receptores de membrana, conectando Pdcd6ip a vias que controlam a sinalização celular e a proteostase. A desregulação do tráfego mediado por ESCRT/ALIX tem sido associada à neurodegeneração, à biologia tumoral e à patogênese imune e viral em sistemas experimentais, tornando Pdcd6ip um nó útil para estudos mecanísticos da dinâmica de membranas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Alix (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pdcd6ip em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pdcd6ip, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pdcd6ip na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Alix.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pdcd6ip para a investigação da sinalização de Alix, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pdcd6ip críticos para a função Alix
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pdcd6ip para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Alix Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Alix Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pdcd6ip. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Alix Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Alix (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pdcd6ip para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pdcd6ip definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.