Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405313

概要

ヒトALDH3A2（脂肪族アルデヒド脱水素酵素、FALDH）は、NAD依存性酵素であり、中鎖および長鎖の脂肪族アルデヒドを対応する脂肪酸へと酸化し、脂質代謝や酸化ストレスの過程で生じる反応性脂質アルデヒドの蓄積を抑制します。ALDH3A2は脂肪アルコールおよびスフィンゴ脂質の異化における重要な構成要素で、プラズマローゲンやエーテル脂質のターンオーバーに由来する脂肪族アルデヒドの分解も含まれます。アルデヒド負荷を制御することで、ALDH3A2は膜脂質の恒常性と細胞のレドックスバランスに寄与します。機能喪失型バリアントはシェーグレン–ラルソン症候群と関連し、神経皮膚病理や脂質介在性の細胞毒性の観点から研究されています。

Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるALDH3A2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ALDH3A2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ALDH3A2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ALDH3A2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2の機能に不可欠なALDH3A2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ALDH3A2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびAldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ALDH3A2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 HDRプラスミド（h）および Aldehyde dehydrogenase 3-A2/ALDH3A2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはALDH3A2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のALDH3A2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。