AKAP 9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405430

概要

AKAP9はA-キナーゼアンカリングタンパク質9（AKAP9）をコードしており、AKAP9はPKAおよびその他のシグナル伝達酵素を特定の細胞内部位に空間的に配置する大型の足場（スキャフォールド）タンパク質です。AKAP9は中心体やゴルジ体に局在し、微小管の構築、ゴルジ体の構造維持、ならびに細胞周期の進行と有糸分裂紡錘体ダイナミクスの協調に寄与します。区画化されたキナーゼシグナル伝達を介して、細胞骨格の再構築や細胞内輸送を制御するリン酸化依存的プロセスに影響を及ぼします。AKAP9の発現変化や再構成は、がんやその他の増殖性疾患で報告されており、シグナル伝達ネットワークの破綻や染色体安定性の研究における有用な標的となります。

AKAP 9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるAKAP9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、AKAP9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、AKAP9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、AKAP 9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、AKAP 9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、AKAP9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• AKAP 9の機能に不可欠なAKAP9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、AKAP9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• AKAP 9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびAKAP 9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、AKAP9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  AKAP 9 HDRプラスミド（h）および AKAP 9 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAKAP9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAKAP9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。