Agrin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401256-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AgrinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Agrin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Agrin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AGRN. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Agrin Anticorpo (D-2): sc-374117
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Agrin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401256-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Agrin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401256-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AGRN codifica a agrina, um grande proteoglicano de sulfato de heparano da matriz extracelular que organiza as interações célula–matriz e regula a formação e a estabilidade das sinapses. Em sinapses neuromusculares e centrais, a sinalização da agrina coordena o agrupamento e a manutenção de especializações pós-sinápticas, sustentando vias que controlam a localização de receptores, a remodelação do citoesqueleto e a organização de domínios de membrana. Além da sinaptogênese, a agrina contribui para a arquitetura da membrana basal, a mecanotransdução e a comunicação entre neurônios e células gliais. A expressão desregulada de AGRN ou o processamento anormal da agrina têm sido associados a alterações da integridade sináptica e ao remodelamento tecidual em contextos neuromusculares e neurodegenerativos, o que respalda seu uso como alvo em estudos de genômica funcional de conectividade e sinalização da matriz extracelular.
Agrin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AGRN em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AGRN. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AGRN. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AGRN interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.