Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
adseverin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422815
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- adseverin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico adseverin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:adseverin Anticorpo (C-2): sc-376136
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
adseverin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422815 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Scin codifica a adseverina, uma proteína da superfamília gelsolina que promove o seccionamento e o capeamento da actina de forma regulada por Ca²⁺, remodelando a dinâmica da actina filamentosa de maneira dependente de estímulos. Ao promover a rápida desmontagem e reorganização dos filamentos de actina, a adseverina sustenta processos como o tráfego de membranas, alterações na forma celular e secreção regulada, particularmente em contextos de células hematopoiéticas e secretoras. A sua atividade cruza-se com a sinalização por cálcio e com vias de controlo do citoesqueleto que influenciam a adesão, a migração e a exocitose de vesículas. A remodelação desregulada da actina e a secreção dependente de cálcio são frequentemente implicadas em fenótipos inflamatórios e neoplásicos, tornando Scin um nó útil para estudos mecanísticos da biologia de doenças ligadas ao citoesqueleto em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO adseverin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Scin em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Scin, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Scin na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína adseverin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Scin para a investigação da sinalização de adseverin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Scin críticos para a função adseverin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Scin para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo adseverin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo adseverin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Scin. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo adseverin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR adseverin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Scin para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Scin definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.