ADH5 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419007-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADH5O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ADH5 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ADH5 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Adh5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADH5 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419007-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADH5 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419007-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Adh5 de camundongo codifica a álcool desidrogenase 5 (ADH5), uma desidrogenase citosólica amplamente expressa que atua como redutase de S-nitrosoglutationa, regulando a bioatividade do óxido nítrico ao metabolizar a S-nitrosoglutationa e adutos relacionados derivados de formaldeído. Ao controlar a S-nitrosilação de proteínas e o equilíbrio redox, a ADH5 influencia as respostas ao estresse oxidativo e nitrosativo, o metabolismo dependente de glutationa e vias de sinalização a jusante que afetam a função mitocondrial e programas inflamatórios. Alterações na atividade da ADH5 têm sido associadas a mudanças na capacidade de desintoxicação e à desregulação da sinalização de NO, com implicações em modelos de lesão hepática, disfunção imune e processos neurodegenerativos nos quais se acumulam espécies reativas de carbonila e de nitrogênio. Assim, o Adh5 oferece um alvo viável para estudar redes de adaptação ao estresse e a regulação sensível ao redox da homeostase celular em sistemas murinos.
ADH5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Adh5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Adh5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Adh5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Adh5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.