ADH5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403859-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADH5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ADH5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ADH5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADH5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ADH5 Anticorpo (B-1): sc-518202
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADH5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403859-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADH5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403859-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADH5 (álcool desidrogenase 5), também conhecida como redutase de S-nitrosoglutationa, é uma desidrogenase citosólica que catalisa a redução dependente de NADH da S-nitrosoglutationa e de substratos aldeídicos relacionados. Por meio do controle da S-nitrosilação de proteínas e da biodisponibilidade de óxido nítrico, a ADH5 influencia a homeostase redox, as respostas antioxidantes e a sinalização do estresse nitrosativo. Essa atividade se conecta ao metabolismo da glutationa e a vias de desintoxicação que modulam a sinalização inflamatória e a resiliência celular ao dano oxidativo. Alterações na função da ADH5 têm sido associadas à desregulação do estresse nitrosativo e vêm sendo exploradas em contextos relevantes para doenças, incluindo biologia do câncer, inflamação cardiovascular e pulmonar e processos neurodegenerativos.
ADH5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADH5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADH5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADH5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADH5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.