ADH1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402260-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADH1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ADH1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ADH1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADH1A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADH1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402260-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADH1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402260-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ADH1A humano codifica a álcool desidrogenase 1A (ADH1), uma oxidorredutase citosólica dependente de zinco que catalisa a oxidação do etanol e de outros álcoois alifáticos e aromáticos de cadeia curta, dependente de NAD⁺, nos seus aldeídos correspondentes. Essa atividade contribui para o metabolismo hepático do álcool e dos retinoides, influenciando o equilíbrio redox e o fluxo de metabólitos, o que pode afetar as respostas ao estresse oxidativo e vias de processamento de lipídios. Variações ou desregulação da atividade da álcool desidrogenase são estudadas no contexto de lesão tecidual relacionada ao etanol e de fenótipos metabólicos, e a expressão de ADH1A é frequentemente usada como marcador do estado de diferenciação de hepatócitos em sistemas experimentais. ADH1A/ADH1 também fornece um ponto de estudo acessível para dissecar o processamento de aldeídos e a sinalização a jusante associada a programas celulares de estresse e inflamação.
ADH1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADH1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADH1A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADH1A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADH1A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.