Adh1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419005

Visão geral

Adh1 codifica a álcool desidrogenase 1, uma oxidorredutase citosólica que catalisa a interconversão, dependente de NAD+/NADH, de álcoois e aldeídos de cadeia curta, contribuindo para o equilíbrio redox celular e para o metabolismo intermediário. Em tecidos de camundongo, a atividade de ADH1 dá suporte ao metabolismo de álcoois e xenobióticos e se integra a vias que controlam a desintoxicação de aldeídos, as respostas ao estresse oxidativo e a homeostase de lipídios/carbonilas. Alterações no processamento de álcoois/aldeídos são relevantes em modelos de lesão hepática, inflamação e disfunção metabólica, nos quais mudanças nas razões NADH/NAD+ e o acúmulo de aldeídos reativos podem influenciar a função mitocondrial e a sinalização. Como enzima metabólica com ampla especificidade de substrato, Adh1 é frequentemente analisada em estudos de capacidade de desintoxicação e de adaptação metabólica específica de tecidos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Adh1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adh1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adh1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adh1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Adh1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adh1 para a investigação da sinalização de Adh1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adh1 críticos para a função Adh1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adh1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Adh1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Adh1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adh1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Adh1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Adh1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adh1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adh1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.