ADHγ CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402261

개요

ADH1C는 인간 알코올 탈수소효소 감마 소단위(ADHγ)를 암호화하며, 이는 아연 의존성 세포질 산화환원효소로서 NAD⁺ 의존적으로 에탄올 및 기타 단쇄 알코올과 알데하이드의 산화를 촉매합니다. 이러한 효소 활성은 알코올 및 레티노이드 대사를 뒷받침하고, NADH/NAD⁺ 균형과 그 하위 알데하이드 처리 경로에 영향을 줌으로써 세포의 산화환원 항상성과도 맞물립니다. ADH1C와 연관된 대사 플럭스의 변이 또는 조절 이상은 아세트알데하이드 부담과 산화 스트레스 반응을 조절할 수 있으며, 이러한 과정은 간 손상, 발암물질 대사, 더 넓은 범위의 대사 표현형과 관련된 것으로 알려져 있습니다. ADH 유전자 클러스터의 일부로서 ADHγ는 간 및 상부 기도·소화관(상부 호흡소화관) 생물학에서 조직 특이적 해독 및 외인성 물질(xenobiotic) 처리에 관한 연구에도 중요합니다.

ADHγ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ADH1C 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ADH1C 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ADH1C의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ADHγ 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ADHγ 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ADH1C 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ADHγ 기능에 중요한 ADH1C 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ADH1C 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ADHγ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 ADHγ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ADH1C 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ADHγ HDR 플라스미드 (h) 및 ADHγ HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ADH1C 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ADH1C 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.