Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400407-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADCY3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400407-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400407-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ADCY3 humano (adenilato ciclase 3, AC3) é uma adenilil ciclase associada à membrana que catalisa a conversão de ATP em AMPc a jusante da sinalização de GPCR. Ao controlar programas de fosforilação dependentes de AMPc/PKA, o ADCY3 influencia a sinalização sensorial, a excitabilidade celular e respostas transcricionais mediadas por CREB e outros efetores responsivos ao AMPc. A atividade da AC3 contribui para dinâmicas compartimentalizadas de segundos mensageiros que moldam processos metabólicos e neuroendócrinos, incluindo a regulação hipotalâmica do balanço energético. Estudos genéticos e funcionais associaram a desregulação do ADCY3 ou variantes desse gene a fenótipos de sinalização de AMPc alterados e a características relevantes para doenças, como obesidade e disfunções metabólicas relacionadas, sustentando seu uso como um nó mecanístico em pesquisas da via GPCR–AMPc.
Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADCY3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADCY3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADCY3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADCY3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.