ADAM19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-418986

概要

ADAM19（a disintegrin and metalloproteinase 19）は、細胞膜に固定されたメタロプロテアーゼであり、細胞表面タンパク質のエクトドメイン・シェディング（切断・遊離）を制御することで、増殖因子やサイトカインのシグナル伝達、ならびに細胞—細胞間相互作用や細胞—細胞外マトリックス間相互作用に影響を与えます。マウス組織では、ADAM19は心血管系および頭蓋顔面の形態形成を含む発生プログラムに寄与し、炎症反応や組織リモデリング応答を調節します。形質膜上で基質のプロセシングを制御することで、増殖・遊走・分化を司る経路と交差し、MAPK/ERKをはじめとするシグナル伝達カスケードに下流効果を及ぼします。ADAM19の活性または発現の変化は、病的な組織リモデリングや線維化に関連する表現型と関連づけられており、疾患モデルにおける機序解明研究の有用な標的となっています。

ADAM19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAdam19遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Adam19内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Adam19のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ADAM19タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ADAM19シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Adam19欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ADAM19の機能に不可欠なAdam19エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Adam19ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ADAM19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびADAM19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Adam19遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ADAM19 HDRプラスミド（m）および ADAM19 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAdam19ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAdam19標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。