ADAM12 Productos CRISPR Knockout y Activación (h)

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Ficha técnica

- Target species: human; for corresponding mouse product, see ADAM12 CRISPR Plasmids (m)
- Los plásmidos consisten en ADAM12 una guia especifica de ARN de 20 nt, obtenida de la libreria GeCKO (v2)
- las secuencias del gRNA dirigen a la proteina Cas9 para que genere un corte de doble cadena (DSB) especificamente en el ADN del gen
- Target-specific CRISPR Plasmids for both gene knockout and activation are available. Please refer to the detailed product information in the tabs below
- El knockdown y la activación génica pueden comprobarse utilizando: ADAM12 Anticuerpo (1G3): sc-293225
- Todos los productos se proporcionan listos para usar, plásmidos purificados de ADN, excepto las Partículas Lentivirales que son envasadas como Párticulas Lentivirales para usar con células dificiles de transfectar.

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ADAM Anticuerpos para el análisis de la respuesta celular del silenciamiento con Productos CRISPR ADAM
ADAM Inhibitors para análisis funcional de respuestas celulares a ADAM
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CRISPR/Cas9 KO plasmids, Double Nickase Plasmids and CRISPR/dCas9 Activation plasmids are considered a "Licensed Product" and are to be used in accordance with the Limited License. Click here for details

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Información del gen

Especies	Nombre del Gen	Gen ID	Ubicación en el cromosoma	Numero de Acceso de Isoforma (ARNm)	Número de Acceso de la Proteína	Número OMIM™
Human	ADAM12	8038	10q26.2	XM_017016705, XM_017016706, NM_001288973, NM_001288974, NM_001288975, NM_003474, NM_021641	O43184	602714

Descripción

20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
ADAM12 Plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) consiste en un conjunto de tres plásmidos, cada uno expresa una nucleasa Cas9 y una ADAM12- guia de RNA de 20 nt (gRNA) diseñada para aumentar la eficiencia del Knockout
Las secuencias del gRNA provienen de la biblioteca genómica GeCKO (v2) y dirigen a la proteína Cas9 para producir la rotura de la doble cadena (DSB) en el ADN genómico (%link_11%)
Para seleccionar las células que contienen un doble corte producido por Cas9, se recomienda la co-trasnfección con ADAM12 Plásmido HDR (h) (sc-402583-HDR)
Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ADAM12 Anticuerpo (1G3): sc-293225

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20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
ADAM12 Plásmido HDR (h) está recomendado para co -transfectar con ADAM12 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h)
ADAM12 Plásmido HDR (h) es un conjunto de 2-3 plásmidos, cada uno contienen una una plantilla para la Reparación del ADN por Homología Dirigida (HDR) correspondientes a los cortes generados por ADAM12 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h)
Cada plantilla HDR contiene dos brazos homólogos de 800 pares de bases, diseñados para unirse específicamente al ADN genómico que rodea el corte inducido por Cas 9
Cada plásmido HDR inserta un gen de resistencia a puromicina para permitir la selección de células con knockout (KO) y RFP (Proteína Roja Fluorescente) para verificar visualmente la transfección
La resistencia a Puromicina y el gen RFP están flanqueados por dos sitios LoxP, para permitir un posterior procesamiento con el Cre Vector sc-418923

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20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
El Plásmido Double Nickase (h)ADAM12 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
Los ARN guía codificados en el Plásmido Doble Nickase (h2 )ADAM12 son diferentes del par codificado en Plásmido Doble Nickase (h)
Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ADAM12 Anticuerpo (1G3): sc-293225

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20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
El Plásmdo de Activación CRISPR (h) ADAM12 es un sistema de activación de la trascripción mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen concreto
Los Plásmdo de Activación CRISPR (h) ADAM12 incluyen los siguientes tres plásmidos, con un radio 1:1:1 : plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada (dCas9), (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64 y el gen de resistencia a blasticidina; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y el gen de resistencia a Higromicina; plásmido codificador de la secuencia diana específica de 20 nt de ARN y el gen de resistencia a puromicina.
El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación genica.
Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ADAM12 Anticuerpo (1G3): sc-293225

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200 µl de Partículas Lentivirales de Activación CRISPR/dCas listas para usar
Partículas Lentivirales de Acitvación (h) ADAM12 es un sistema de activación de la trascripción por mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen determinado a través de la tranducción lentiviral de las células
Partículas Lentivirales de Acitvación (h) ADAM12 incluyen los siguientes elementos activadores SAM: plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada, (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y un plásmido que codifica la secuencia de diana específica de 20 nt de ARN. También contienen genes de resistencia a blasticidina, higromicina y puromicina.
El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación génica
El ARN guía de las Partículas Lentivirales de Activación (h2) ADAM12 codifica una secuancia diana especifica de 20 nt, que es diferente del ARN guia de Partículas Lentivirales de Activación (h)
Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ADAM12 Anticuerpo (1G3): sc-293225

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